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本文標題:"瓊脂培養基常用于將噬菌體或細胞在平板"

發布者:yiyi ------ 分類: 行業動態 ------ 人瀏覽過-----時間:2017-1-14 4:30:18

瓊脂培養基常用于將噬菌體或細胞在平板

 
頂層瓊脂培養基
    頂層瓊脂培養基常用于將噬菌體或細胞在平板的表面均勻分布
成一薄層。以1L的批量配制頂層培養基,高壓1 5 min并使之熔化
,冷卻至50℃,輕輕旋轉晃動使其混合均勻,分裝至100 ml燒瓶中
。再次高壓,冷卻,于室溫保存。使用前,用水浴或者微波爐熔化
頂層瓊脂,然后冷卻至40一50℃并維持在該溫度。頂層瓊脂中瓊脂
的含量比普通平板要少,如果置于45~50℃溫度,頂層瓊脂可保持
熔化狀態數天。質粒圖譜
    質粒在所有的細菌類群中都可發現,它們是獨立于細菌染色體
外自我復制的DNA分子。自然界中,質粒是在營養充足時出現,它
在結構,大小,復制方式,每個細菌的拷貝數,在不同的細菌體內
的繁殖力,在菌種之間的轉移力等方面都會變化,可能最重要的是
質粒所攜帶的特征的改變。大多數原核生物的質粒是雙鏈環狀的DN
A分子;但是無論是在革蘭氏陽性還是陰性菌體內都可發現線狀質
粒。質粒大小變化很大,可從幾個到數百個kb。質粒依靠宿主細胞
提供的蛋白質進行復制,但也可使宿主細胞獲得質粒編碼的功能。
質粒復制可以與細菌的細胞周期同步,導致菌體內質粒的拷貝數較
低,質粒復制也可獨立于細胞周期,使每個菌體內擴增了成百上千
個質??截悺R恍┵|粒在菌種間可自由地轉移它們的DNA分子,另
一些只轉移質粒給同種細菌,而有些卻根本不轉移它們的DNA。質
粒帶有具有許多功能的基因,這些功能包括對抗生素和重金屬的抗
性,對誘變原的敏感性,對噬菌體的易感或抗性,產生限制酶,產
生稀有的氨基酸和毒素,決定毒力,降解復雜有機分子,以及形成
共生關系的能力和在生物界內轉移DNA的能力。
    所有的質粒載體都有三個共同的特征:一個復制子,一個選擇
性標志和一個克隆位點。復制子是含有DNA復制起始位點的一段DNA
(ori),也包括表達由質粒編碼的復制必需的RNAs和蛋白質的基因
。選擇性標志對于質粒在細胞內持續存在是必不可少的,通常是顯
性的,并且往往是編碼對某個抗生素有抗性的基因??寺∥稽c是限
制性核酸內切酶切割位點,外源性DNA可由此插入質粒內,而并不
影響質粒的復制能力,或為宿主提供選擇性表型。載體發展的趨勢
是單一載體具有多個特征。
 

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