本文標題:"濾膜質(zhì)粒溶解的雜質(zhì)直徑分析圖像顯微鏡"
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濾膜質(zhì)粒溶解的雜質(zhì)直徑分析圖像顯微鏡
濾膜法無須離心即可將堿性的裂解產(chǎn)物快速清除。裂解后離心
是質(zhì)粒純化中最耗時步驟之一,尤其在涉及大規(guī)模培養(yǎng)和大批量樣
品處理時。而使用商用濾膜可在裂解細胞后有效的去除SDS沉淀和
細胞碎片,可除去在中和過程中形成的線粒體DNA、鹽、去垢劑以
及蛋白質(zhì)等不能溶解的雜質(zhì),并且不會引起堵塞、氣泡以及DNA降
解等情況。在這個過程中所用的過濾材料不與DNA結(jié)合,因此i叮避
免過濾過程巾的任何損耗。
最新的研究進展是將濾膜與同相萃取技術(shù)相結(jié)合,這些過濾模
塊裝有獨特的硅膠膜,能在高濃度離液鹽溶液中結(jié)合高達20 μgDN
A,并能用小體積低濃度緩沖液將DNA洗脫。這種裝置裝有一個不對
稱的片狀膜,有+系列不同孔徑的膜以滿足去除沉淀中雜質(zhì)的需要
。這種膜濾法不再需要冗長的苯酚一氯仿萃取及乙醇沉淀,在膜系
統(tǒng)中嵌入了硅膠也可避免疏松的樹脂和泥漿帶來的問題。通常這種
方法得到的高純度質(zhì)粒DNA可以直接使用,而不需要沉淀、富集或
脫鹽等進一步處理。
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