詳細(xì)了解生物顯微鏡及其應(yīng)用

生物顯微鏡是對(duì)細(xì)胞，組織進(jìn)行觀察和研究的重要儀器。生物顯微鏡按其性能可分為普通光學(xué)顯微鏡和精密度很高的電子顯微鏡。在解剖學(xué)實(shí)驗(yàn)中，主要介紹普通光學(xué)顯微鏡。光學(xué)顯微鏡是觀察人體微細(xì)結(jié)構(gòu)的常規(guī)儀器。了解和掌握顯微鏡的結(jié)構(gòu)和使用方法是學(xué)習(xí)人體形態(tài)結(jié)構(gòu)的有效方法之一。通過(guò)顯微鏡可以觀察細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)和人體各組織，器官的微細(xì)結(jié)構(gòu)，使學(xué)習(xí)者能更直觀的掌握人體的結(jié)構(gòu)和功能，對(duì)其他課程的學(xué)習(xí)起促進(jìn)作用。

原理

1，成像：由外界入射的光線(xiàn)經(jīng)反光鏡發(fā)射向上，或由內(nèi)光源發(fā)射的光線(xiàn)經(jīng)聚光鏡聚在標(biāo)本上，使標(biāo)本有足夠的照明，由標(biāo)本反射或折射的光線(xiàn)經(jīng)物鏡進(jìn)入光軸與水平面傾斜45度的棱鏡，在目鏡的視場(chǎng)光闌處，成放大實(shí)像，此實(shí)像經(jīng)目鏡的接目透鏡放大成虛像，所以人們看到的是虛像。

2，放大倍數(shù)：標(biāo)本經(jīng)生物顯微鏡的目鏡與物鏡放大后的總放大倍數(shù)是顯微鏡與目鏡放大倍數(shù)的乘積。

3，分辨率：對(duì)任何顯微鏡來(lái)說(shuō)，分辨率是最重要的性能參數(shù)。光學(xué)生物顯微鏡的分辨率D與光波波長(zhǎng)γ，物鏡鏡口角α和介質(zhì)折射率n有關(guān)。因此，光學(xué)顯微鏡中，γ越短，n和α越大，則D值越低，分辨率就越高。通常情況下，α最大值可達(dá)到140度，空氣中n=1，最短的可見(jiàn)光的波長(zhǎng)為450毫米。因此，根據(jù)不同的α和γ，可以得到不同的分辨率來(lái)觀察樣本。最常用的普通光學(xué)顯微鏡的最大分辨率為0.2μm（也就是指區(qū)分兩個(gè)質(zhì)點(diǎn)的最小距離是0.2μm），最大放大倍數(shù)可達(dá)1000~1500倍，其他顯微鏡都是在此基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的。

4，樣品要求：普通光學(xué)生物顯微鏡是利用樣品對(duì)光的吸收形成明暗反差和顏色變化來(lái)觀察的，因而對(duì)樣品有較高的要求。觀察樣品通常要經(jīng)過(guò)固定劑固定、包埋劑包埋后，切成厚度為5μm左右的薄片，經(jīng)染色后才能觀察，對(duì)于活細(xì)胞或未經(jīng)染色的細(xì)胞不能進(jìn)行觀察。